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人外周血內(nèi)皮祖細胞分離培養(yǎng)總結(jié)會

更新時間:2024-11-06      點擊次數(shù):756
簡介:上海達為科生物科技有限公司,位于上海長江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。 我們擁有專業(yè)的實驗室、先進的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,致力于動物模型、動物實驗、動物實驗外包、整體實驗外包,細胞實驗、細胞實驗外包、整體畢業(yè)課題等等。
 
  詳情:本周三  2024年11月6日,公司組織,由實驗室主管劉博主導(dǎo),實驗室全體成員參與,對人外周血內(nèi)皮祖細胞分離培養(yǎng)中的相關(guān)知識點,進行了培訓(xùn)與交流。
 

  本次會議,主要針對人外周血內(nèi)皮祖細胞分離培養(yǎng),就以下內(nèi)容展開了交流:

1.血液樣本的準備:首先從健康供者或患者身上通過外周靜脈抽取血液樣本,并使用抗凝劑處理。

  

2.單核細胞的分離:通過密度梯度離心法,如使用Ficoll-Paque等介質(zhì),將血液樣本中的單核細胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCs)分離出來。

  

3.細胞的培養(yǎng):將分離出的PBMCs以適當(dāng)?shù)募毎芏冉臃N到預(yù)先涂覆有細胞粘附因子(如纖維連接蛋白)的培養(yǎng)容器中,并使用專門的內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。培養(yǎng)條件通常包括適宜的溫度(37°C)、5% CO2的氣體環(huán)境和一定的濕度。

  

4.細胞的誘導(dǎo)分化:為了促進EPCs的生長和分化,通常會向培養(yǎng)基中添加多種生長因子和細胞因子,如血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、表皮生長因子(EGF)和胰島素樣生長因子(IGF)等。

  

5.細胞的鑒定:EPCs的鑒定通?;诩毎砻鏄酥疚锏谋磉_,如CD31、CD34、CD133、KDR(血管內(nèi)皮生長因子受體-2)和vWF(血管假性血友病因子)。流式細胞術(shù)和免疫熒光染色是常用的鑒定方法。

  

6.細胞的擴增和功能驗證:通過傳代培養(yǎng),可以擴增獲得足夠數(shù)量的EPCs。此外,還可以通過體外毛細血管形成實驗等功能性實驗來驗證EPCs的功能。

本次會議,提升公司對人外周血內(nèi)皮祖細胞分離培養(yǎng)的重要知識點的認知。



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